Suspension? 293 （XF）懸浮培養(yǎng)基由100多種小分子化合物組成的無血清無動物組分的培養(yǎng)基，適用于細(xì)胞的293系列懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應(yīng)器培養(yǎng)，培養(yǎng)基不含有蛋白，添加少量激素可維持細(xì)胞內(nèi)正常蛋白表達(dá)含量，組分穩(wěn)定，批次無差異。

培養(yǎng)基配方：

500ml Suspension? 293 （XF）懸浮培養(yǎng)基(啟達(dá)生物：SP03)，25ml Suspension? 293 （XF）懸浮細(xì)胞添加物(啟達(dá)生物：SP03-1)，5ml G/A(啟達(dá)生物 :SD0038）

操作步驟：

細(xì)胞從常規(guī)培養(yǎng)基到無血清培養(yǎng)基的適應(yīng)性訓(xùn)練方法根據(jù)細(xì)胞的類型分為2種:

對于懸浮細(xì)胞（需要2-6周）：

1. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時開始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 加入無血清培養(yǎng)基，使無血清培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基的比例變?yōu)樵瓉淼?/2；

3. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時，加入無血清培養(yǎng)基，使細(xì)胞密度成為原來的1/5；

4. 培養(yǎng)細(xì)胞，如果細(xì)胞達(dá)到最大密度時，細(xì)胞的存活率大于85％，并且達(dá)到最大密度的時間與之前

相近，那么細(xì)胞可以繼續(xù)進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練；如果細(xì)胞顯示生長緩慢或者存活率降低，那么需要重復(fù)2-3

步鄹3次；

5. 可逐步提高無血清培養(yǎng)基的比例，直至細(xì)胞可以完全在無血清培養(yǎng)基中生長。

對于貼壁細(xì)胞（需要2-6周）：

1. 細(xì)胞達(dá)到最大密度時，開始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 胰酶消化貼壁細(xì)胞，350×g離心5min收集細(xì)胞，用含5％血清的無血清培養(yǎng)基重懸，使細(xì)胞密度達(dá)

到4×10^5cells/ml；

3. 培養(yǎng)細(xì)胞至達(dá)到最大密度；

4. 重復(fù)2 - 3步驟，依次在無血清培養(yǎng)基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血清，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；如果

細(xì)胞的存活率低于80％，那么需要恢復(fù)至前一個血清的含量，或者采用更加細(xì)化的遞減含量。

5. 直到完全使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。

備注：100ml瓶裝無套件，為整瓶配制。

聲明：產(chǎn)品僅科研使用。